Популярные Нано Технологии

Размещение материала

Для размещения материала в данном разделе заполните пожалуйста эту форму.

Кадры

Фотогалерея

НИОКР

Протоколы приготовления образцов молекул ДНК для измерения методом АСМ / 04.04.2008

© М.Н.Савватеев

Источник: НТ-МДТ

Автор: М.Н.Савватеев, НТ-МДТ 

Атомно-силовая микроскопия (АСМ) в настоящее активно используется для изучения структурных особенностей биологических макромолекул (белков, ДНК), поскольку позволяет получать изображения с разрешением в несколько нанометров [1-3]. Наряду с исследованием сухих образцов, АСМ позволяет исследовать молекулы и в буферных растворах. Для получения изображений методом АСМ, исследуемые объекты должны быть зафиксированы на какой-либо поверхности. При исследовании молекул ДНК в качестве подложки обычно используется кристаллическая слюда, поверхность которой является атомарно-гладкой. Для того чтобы прикрепить отрицательно заряженные молекулы ДНК на слюду, поверхность которой в воде также имеет отрицательный заряд, существует ряд методов, обзор которых приведен в данной заметке.  Приводимые в качестве иллюстраций АСМ изображения были получены на приборах серии Solver и Ntegra, «полуконтактным» методом на воздухе и в жидкости.

1. Добавление ионов двухвалентных металлов
Наиболее простым способом является добавление в буфер ионов двухвалентных металлов, которые играют роль мостиков между отрицательно заряженными поверхностью слюды и молекулой ДНК. Согласно работе [4], для крепления молекул ДНК наиболее подходят ионы никеля, фототехника, кобальта и цинка, они обеспечивают надежное связывание с поверхностью слюды, достаточное для проведения измерений в жидкости.
Для приготовления образца препарат ДНК разводят до концентрации около 1 мкг/мл в буфере, содержащем 5мМ HEPES и 1-5 мМ NiCl2. На слюду наносят каплю раствора, инкубируют ее 5 минут и измеряют в буфере (рис. 1а), либо промывают в воде, сушат и измеряют на воздухе (рис. 1б).

Рис 1.  АСМ изображения образца кольцевой плазмидной ДНК pEGFP, приготовленного с помощью ионов никеля. Изображение (а) получено «полуконтактным» методом в буфере, изображение (б) получено «полуконтактным» методом на воздухе.

TOP100 самых популярных
научных разработок
за месяц
Место Наименование Показов
1

Монокристаллический кремний. Технология производства

Данная технология относится к области получения монокристаллов полупроводниковых материалов и может быть использована при получении монокристаллов кремния методом Чохральского. Данная технология относ

244
2

Магнитные наночастицы: проблемы и достижения химического синтеза

Основную часть обзора составляют три раздела собирательно названные по сути методов получения магнитных наночастиц - 1. Гидролиз, соосаждение, 2. Мицеллы и 3. Термолиз. Разделы окаймляются общим введе

149
3

Главная загадка квантовой механики (видео)

В видео раскрывается главная загадка квантовой механики доступным языком. Для введения в курс, кратко о том, что такое квантовая механика. Квантовая механика — раздел теоретической физики, о

125
4

Углеродные нанотрубки для наноробототехники

Перевод: Батук Д.Н., Ефремова М.М. Благодаря своему строению, исключительной механической прочности и уникальным электрическим характеристикам, углеродные нанотрубки являются перспективным материалом

89
5

Многофункциональные наноструктурные пленки

Автор: Е.А.Левашов Новые материалы являются основой технологий 21 века, а индустрия наносистем и материалов - одно из приоритетных направлений развития науки и техники, влияющих сегодня почти на все

75

Анонсы событий